原理：空氣由前新風口進入負壓風道與柜體內空氣充分混合后，由風機送入靜壓箱，經過濾器過濾后以垂直層流的狀態進入操作區，操作區左右及后部墻體均為負壓風道，使工作區與外部環境形成氣幕及箱體雙層隔離。
二級生物安全柜利用的是超率的過濾器和負壓箱體構成的負壓通風柜，用于保護實驗環境，保護操作者以及實驗材料等危險生物因子，所產生的氣容性侵害以及感染等，適合用在危險組以及感染性強悍的物質實驗中，同時還廣泛的運用在揮發性，具備毒化化學物質以及放射性物質的生物實驗中，二級生物安全柜的運用面積更為廣泛。
二級生物安全柜是運用廣泛的安全柜，它是產品，保護人員以及環境負壓過濾的通風柜，向內的氣流前開口對于人員起到保護性作用。垂直向下的過濾層氣流作為可保護產品，污染氣流經過過濾器保護之后，能夠有效的保護環境，有利于微量揮發以及有毒氣流的保護中，污染性的氣體作為輔助制劑必須連接合適的排氣罩。利用垂直氣流以及吸入氣管混合作為之后主要的部分。
